来源：雪球App，作者： 飞晨曦，（https://xueqiu.com/9067288472/300619928）
双抗的历史
双抗已有60年发展历史，2014之后双抗热潮再起，随着全球制药巨头纷纷投入双特异性抗体技术平台的研发，双特异性抗体药物的研发进入了高速发展阶段。近年来，许多双特异性抗体药物进入了临床后期试验或已上市。这一趋势表明双特异性抗体的研究和开发正处于蓬勃发展的阶段，并展示了其在治疗领域中的潜力和重要性。
双抗的功效
双特异性抗体（Bispecific antibodies）具有多种功效，包括以下几个方面：
1、同时靶向多个抗原：双特异性抗体可以同时结合并识别两个不同的抗原，或者一个抗原的两个不同表位。这种能力可以扩展抗体的应用范围，使其能够同时作用于多个目标，增强治疗效果。
2、增强免疫细胞的效应：一类双特异性抗体被设计为能够结合肿瘤细胞和免疫细胞，从而促进免疫细胞的活化和导向，增强它们对肿瘤细胞的攻击能力。这种机制可以激活免疫系统，增强抗肿瘤免疫应答。
3、降低靶向毒性：双特异性抗体的设计可以选择性地将药物或细胞毒素传递到肿瘤细胞，减少对正常细胞的毒性影响。这种靶向性可以提高治疗效果，同时降低副作用和毒性。
4、桥接不同免疫细胞类型：双特异性抗体可以连接不同类型的免疫细胞，例如连接T细胞和肿瘤细胞，促进免疫细胞之间的相互作用，增强免疫应答。这种桥接作用可以激活细胞介导的免疫反应，并提高治疗效果。
双抗的分类及结构
根据结构的不同，双特异性抗体可以分为两类：不含Fc片段的双特异性抗体（非IgG样双特异性抗体）和含Fc片段的双特异性抗体（IgG样双特异性抗体）。
※非IgG样双特异性抗体是指将多个抗原结合片段结合在没有Fc区域的分子上，从而避免了链交联问题，并且缺乏Fc介导的相关效应功能。这类抗体主要通过其抗原结合特性来发挥相应的效应机制。非IgG样双特异性抗体具有较低的免疫原性，清除速度更快，半衰期较短，可能在某些不良反应方面具有安全优势。
※IgG样双特异性抗体是将两个不同靶点的单价抗体组合而成，并具有Fc片段，因此可以发挥Fc介导的效应功能。这类双特异性抗体通过Fc片段与受体FcRn结合，使其在血清中的半衰期相对较长，可能在给药频次方面具有优势。此外，IgG样双特异性抗体还可以对Fc段进行静默处理，以减少潜在的免疫反应。
双抗的作用机制
双特异性抗体具有识别和结合两种不同的抗原或抗原表位的能力，这使得它们具备了联合疗法所不具备的生物学活性，从而展示了巨大的治疗潜力。
目前处于临床研究阶段的双特异性抗体利用多种机制发挥其治疗作用，包括细胞桥接、受体交联、辅助因子模拟和背负式运输等。细胞桥接机制指的是双特异性抗体能够同时结合肿瘤细胞和免疫细胞，促进两者之间的相互作用，从而增强免疫细胞对肿瘤细胞的攻击能力。受体交联机制是指双特异性抗体能够结合并激活多个受体，从而引发多个信号通路，增强治疗效果。辅助因子模拟机制是指双特异性抗体模拟并增强自然免疫系统中的辅助因子的功能，增强免疫应答。背负式运输机制是指双特异性抗体可以将药物或细胞毒素运输到靶细胞，提高治疗的靶向性和效果。
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效应T细胞重定向类双抗
效应T细胞重定向：通过与TCR复合物的CD3ε结合。
采用效应T细胞重定向机制的双特异性抗体通常以CD3和一个肿瘤相关抗原（TAA）为靶点。
双特异性抗体的一端与肿瘤细胞表面的TAA结合，另一端与T细胞表面的TCR复合物中的CD3ε结构结合。这种结合方式绕过了MHC复合物途径，直接激活效应T细胞，使其具备杀伤肿瘤细胞的能力。通过这种机制，双特异性抗体能够将效应T细胞引导到肿瘤细胞，并激活T细胞的杀伤功能，从而实现对肿瘤的攻击。
这种效应T细胞重定向的策略允许双特异性抗体同时识别和结合肿瘤细胞和T细胞，并在二者之间建立桥梁。通过绕过MHC复合物途径，双特异性抗体能够直接激活效应T细胞，无需依赖肿瘤细胞表面的MHC分子呈递抗原。这种机制在提升效应T细胞的杀伤能力和扩展适用范围方面具有潜力，因此在肿瘤治疗中受到广泛关注和研究。
为了优化CD3类双特异性抗体的安全性和有效性，可以进行多种抗体工程改造。
Fc段改造
在临床研究中，CD3类双特异性抗体易在极低剂量下引发严重的细胞因子释放，这导致了部分药物的开发失败。
细胞因子异常释放的主要机制与双特异性抗体的Fc段效应有关。双特异性抗体的Fc段可以与多种免疫细胞结合，进而导致细胞因子的异常释放。这种不良反应被称为细胞因子释放综合征（cytokine release syndrome，CRS），其严重程度可能取决于双特异性抗体的结构和濃度。
为了解决这个问题，目前临床上正在研究的CD3类双特异性抗体均对其Fc段进行改造。改造的目标是减小Fcγ受体（FcγR）的亲和性，以减少免疫细胞的激活和细胞因子的异常释放。这可以通过多种方法来实现，例如通过点突变或Fc区域的重组来降低FcγR结合能力，或者通过引入抗体工程技术来调整Fc段的结构和功能。
这些改造措施旨在减少CD3类双特异性抗体引起的细胞因子释放和相关不良反应，从而增加治疗的安全性和耐受性。通过精确调控双特异性抗体的Fc段，可以平衡其治疗效果和副作用，为患者提供更好的治疗选择。
CD3臂改造
CD3的亲和性和效价对于双特异性抗体药物的效果也具有重要影响。
具有低亲和性的CD3臂有利于双特异性抗体在肿瘤部位的富集，避免了人体对双特异性抗体的快速清除。较低的亲和性可以减少与循环中的自然杀伤细胞（NK细胞）的结合，从而延长双特异性抗体在体内的半衰期并增加其在肿瘤组织中的停留时间。这有助于提高抗肿瘤效应，并减少剂量依赖性的不良反应。
单价的CD3臂不会诱导CD3的交联，从而避免了抗原调变（肿瘤细胞表面抗原表达减少）和异常细胞因子释放。CD3的交联会导致T细胞活化和细胞因子释放，但在一些情况下可能会引发不必要的细胞因子释放综合征（CRS）等严重副作用。通过使用单价CD3臂，双特异性抗体可以避免非特异性的T细胞激活，从而降低不良反应的风险，并确保对肿瘤细胞的选择性杀伤。
总结而言，选择具有低亲和性的CD3臂和单价CD3臂的双特异性抗体有助于提高药物在肿瘤部位的富集，减少抗原调变和异常细胞因子释放的风险。这些改进有助于增强双特异性抗体的抗肿瘤效应，并提高治疗的安全性和耐受性。
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双免疫细胞靶点类双抗
双免疫检查点类双特异性抗体。
例如PD-1/CTLA-4双特异性抗体，通过提高双特异性抗体与PD-1的结合亲和力，同时降低与CTLA-4的结合亲和力，减少了CTLA-4对外周T细胞的结合，从而提升了药物的安全性。
免疫检查点/免疫活化靶点类双特异性抗体。
以4-1BB/PD-L1双特异性抗体ES101为例，单独使用4-1BB激活剂会出现较强的毒性。通过双特异性抗体的设计，ES101针对PD-L1的亲和力较4-1BB高出10倍。
只有当ES101结合了PD-L1之后，4-1BB结合域才有可能驱动4-1BB分子在T细胞表面的聚集。4-1BB的聚集是激活T细胞所必需的信号活化过程。这种设计使得4-1BB介导的免疫激活效应集中于肿瘤附近的T细胞，有效降低了潜在的脱靶毒性。
通过调整双特异性抗体的结合亲和力和特异性，可以实现对免疫检查点和免疫活化靶点的精准调控。这种设计策略使得双特异性抗体能够在目标细胞表面实现选择性结合和免疫激活，从而增强治疗效果，减少毒性副作用，并提高药物的安全性。
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受体交联类双抗
受体交联类双特异性抗体是一类能够同时结合两种不同受体的抗体。这种抗体的设计目的是通过交联两种受体来激活或抑制相关的信号通路，以达到治疗效果。
例如，受体交联类双特异性抗体可以结合肿瘤细胞表面的抗原受体和激活性的共刺激受体，从而实现对肿瘤细胞的选择性杀伤和免疫激活。
这种双特异性抗体的设计通常包括两个结合域，每个结合域具有与不同受体相互作用的特异性。通过同时结合两种受体，双特异性抗体可以促使受体之间的交联，触发相关的信号传导路径。
受体交联类双特异性抗体的应用有多种多样。例如，在肿瘤治疗中，受体交联类双特异性抗体可以结合肿瘤细胞上的抗原受体和T细胞上的共刺激受体，从而激活T细胞的抗肿瘤效应。此外，受体交联类双特异性抗体还可用于调节自身免疫疾病、传染病和炎症等其他疾病的免疫反应。
通过设计受体交联类双特异性抗体，可以实现对细胞信号通路的精确调控，以提高治疗的效果并减少不良反应。这种抗体的研究和开发为创新的治疗策略和个体化医疗提供了潜在的机会。
双靶点结合阻断补偿通路
双靶点结合类双特异性抗体具有两个重要优势。首先，它们能够同时抑制两个靶点的激活，以更有效地抑制疾病相关的信号通路。其次，相较于单一靶点的抗体联合使用，双靶点结合类双特异性抗体具有明显的优势。
以Rybrevant为例，该双特异性抗体的设计不仅可以同时抑制EGFR和c-Met两个靶点，还避免了由单一靶点抑制后产生的旁路信号通路激活上调的问题。此外，它还规避了二价c-Met单抗诱导c-Met蛋白二聚化的效应。这种设计使得抗体本身不会增强c-Met的激活。
通过使用双靶点结合类双特异性抗体，可以同时抑制多个关键的病理通路，从而更有效地干预疾病的发展。这种策略有助于避免单一靶点抑制后产生的抗药性和治疗失败，并提供了更全面和持久的治疗效果。
单靶点双表位结合
单靶点双表位结合是指通过设计抗体，使其能够同时结合抗原的两个不同表位。这种设计策略可以增强抗原的交联和聚集效果，进而增加抗体与抗原的结合活性。同时，它也能够增强抗体的内化作用以及Fc段介导的免疫学效应。
通过双表位结合，抗体能够同时与抗原的两个表位发生特异性的结合，促使抗原分子之间的相互作用，形成聚集或交联的复合物。这种聚集和交联现象增加了抗体与抗原之间的结合力和亲和力，从而提高了抗体的结合活性。
另外，双表位结合还能够促进抗体的内化过程，即抗体与抗原复合物被细胞摄取进入细胞内部。这对于一些需要通过内化进一步发挥作用的治疗策略来说尤为重要。
此外，双表位结合还可以增强抗体的Fc段介导的免疫学效应。Fc段介导的免疫学效应包括抗体依赖性细胞毒性（ADCC）和补体依赖性细胞毒性（CDC），它们在抗体治疗中起着重要作用。通过增强抗体与抗原复合物的结合活性，双表位结合能够增强Fc段与免疫细胞或补体系统的相互作用，进而增强免疫学效应的发挥。
因此，单靶点双表位结合的设计策略可以提高抗体的结合活性，增强内化过程以及Fc段介导的免疫学效应。
双靶点结合靶向肿瘤微环境
双靶点结合靶向肿瘤微环境是基于联合治疗的策略。以科望医药的ES104为例，该抗体通过同时阻断VEGF和DLL4两个信号通路，展示了在多种实体瘤中具有强大的抗肿瘤活性。
ES104是一种双特异性抗体，能够同时结合并抑制血管内皮生长因子（VEGF）和Delta-like ligand 4（DLL4）这两个与肿瘤微环境密切相关的信号通路。VEGF是血管生成的主要调节因子，而DLL4则参与了肿瘤血管生成中的Notch信号通路。通过同时抑制这两个信号通路，ES104可以干扰肿瘤血管生成和肿瘤微环境中的关键调控过程。
研究表明，ES104在多种实体瘤模型中表现出强大的抗肿瘤活性。通过抑制VEGF和DLL4的双重作用，ES104可以抑制肿瘤血管生成、降低肿瘤血供，从而抑制肿瘤生长。此外，ES104还可以干扰肿瘤微环境中的免疫调节，促进抗肿瘤免疫应答。
这种双靶点结合靶向肿瘤微环境的策略为肿瘤治疗提供了新的思路。通过联合抑制多个与肿瘤生长和微环境调节相关的信号通路，可以更有效地抑制肿瘤的发展，并提高治疗的效果。
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辅助因子模拟
辅助因子模拟是一种利用双抗的两个抗原结合部位分别结合不同分子的策略，从而使它们形成功能复合体。例如，艾美赛珠单抗通过分别靶向桥连凝血因子IXa和凝血因子X，在血友病患者中模拟替代凝血因子VIII的功能，促进凝血酶的产生，从而降低出血风险。
在这种策略中，艾美赛珠单抗的双抗原结合部位分别与桥连凝血因子IXa和凝血因子X结合，形成一个复合体。通过这个复合体的形成，桥连凝血因子IXa和凝血因子X之间的相互作用被促进，从而模拟并增强凝血因子VIII的功能。这进一步促使凝血酶的产生，改善血友病患者的凝血功能，减少出血的风险。
辅助因子模拟的策略为血友病等凝血功能障碍性疾病的治疗提供了一种创新的方法。通过利用双抗的两个抗原结合部位，可以实现对多个靶点的同时调控，从而模拟正常凝血机制，并改善疾病患者的凝血功能。这种策略的应用为疾病治疗提供了新的途径，并带来了更好的临床效果和生活质量的提高。
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